紫外可見(jiàn)檢測(cè)器靈敏度高,噪音低,線性范圍寬,對(duì)流速和溫度均不敏感,可于制備色譜。由于靈敏高,因此既使是那些光吸收小、消光系數(shù)低的物質(zhì)也可用UV檢測(cè)器進(jìn)行微量分析。但要留意活動(dòng)相中各種溶劑的紫外吸收截止波長(zhǎng)。假如溶劑中含有吸光雜質(zhì),則會(huì)進(jìn)步背景噪音,降低靈敏度。此外,梯度洗脫時(shí),還會(huì)產(chǎn)生漂移。
紫外可見(jiàn)檢測(cè)器檢測(cè)方式:
紫外可見(jiàn)檢測(cè)器檢測(cè)方式有直接紫外檢測(cè)、間接紫外檢測(cè)和柱后衍生化光度檢測(cè)等。
1、直接紫外檢測(cè):使用的流動(dòng)相為在檢測(cè)波長(zhǎng)下無(wú)紫外吸收的溶劑,檢測(cè)器直接測(cè)定被測(cè)組分的紫外吸收強(qiáng)度。 多數(shù)情況下采用直接紫外檢測(cè)。
2、間接紫外檢測(cè):使用具有紫外吸收的溶液作為流動(dòng)相,間接檢測(cè)無(wú)紫外吸收的組分。 在離子色譜中使用較多,如以具有紫外吸收的鄰苯二甲酸氫鉀溶液作為陰離子分離的流動(dòng)相,當(dāng)無(wú)紫外吸收的無(wú)機(jī)陰離子被洗脫到流動(dòng)相中時(shí),會(huì)使流動(dòng)相的紫外吸收減小。
3、柱后衍生化光度檢測(cè): 對(duì)于可與顯色劑反應(yīng)生成有色配合物的組分(過(guò)渡金屬離子和氨基酸等),可在被測(cè)組分從色譜柱中洗脫出來(lái)后與合適的顯色劑反應(yīng),在可見(jiàn)光區(qū)檢測(cè)生成的有色配合物。
使用紫外可見(jiàn)檢測(cè)器檢測(cè)時(shí),為了得到高的靈敏度,常選擇被測(cè)組分能產(chǎn)生zui大吸收的波長(zhǎng)作為檢測(cè)波長(zhǎng),但為了選擇性或其它目的也可適當(dāng)降低靈敏度而選擇吸收稍弱的波長(zhǎng)。另外,應(yīng)盡可能選擇在檢測(cè)波長(zhǎng)下沒(méi)有背景吸收的流動(dòng)相。